原因：HRP的濃度過高；

解決：稀釋HRP至少10倍。

原因：HRP的濃度過高；

解決：稀釋HRP至少10倍。

原因：HRP的濃度過高；

解決：稀釋HRP至少10倍。

原因：HRP的濃度過高；

解決：稀釋HRP至少10倍。

原因：

1.太多的HRP積聚導致信號快速的消退；

2.抗原或抗體的濃度不夠；

3.轉印不成功；

4.HRP或其他底物的效價降低。

解決：

1.稀釋HRP至少10倍；

2.增加其濃度；

3.尋找合適的轉移方法和條件；

4.選擇其他的合適底物。

原因：

1.HRP濃度過高；

2.封閉無效；

3.不適合的封閉試劑；

4.洗滌不充分和洗滌液的量；

5.膠片曝光過度；

6.抗原或抗體的濃度太高。

解決：

1.稀釋HRP至少10倍；

2.尋找合適的封閉方法；

3.選用其他的封閉試劑；

4.增加洗滌的時間,次數；

5.減少曝光時間；

6.稀釋抗原或抗體。

原因：

1.蛋白質沒有被充分轉??；

2.膜沒有預先浸濕；

3.在膠片和膜之間有氣泡。

解決：

1.尋找合適的轉移方法和條件；

2.在轉印前充分浸濕；

3.在暴光之前趕走氣泡。

原因：HRP標記的抗體出現了積聚；

解決：稀釋HRP至少10倍。

原因：

1.HRP濃度過高；

2.SDS促使非特異蛋白質條帶黏附在目的蛋白質條帶上。

解決：

1.稀釋HRP至少10倍；

2.在操作過程中不要加SDS。